الطلب على الأكسجين الكيميائي الحيوي ( BOD ) بأنها كمية الأوكسجين المذاب المستهلكة من قبل الكائنات الحية الدقيقة التي تتحلل بعض المواد القابلة للتأكسد في الماء ، ولا سيما المواد العضوية ، في ظل ظروف معينة . هذه العملية تستغرق وقتا طويلا جدا ، على سبيل المثال ، في 20 ℃ الثقافة العملية برمتها تحتاج إلى 100 يوم ، وفقا للوائح الدولية الموحدة الحالية ، في 20 ± 1 ℃ درجة الحرارة ، بعد خمسة أيام من الثقافة نتيجة الاختبار ، ودعا خمسة أيام من الطلب على الأكسجين الكيميائي الحيوي ، سجلت bod5 ، مع تركيز كتلة من ملغ / لتر . على الرغم من أن هناك الكثير من المواد العضوية في مياه الصرف الصحي ومياه الصرف الصناعي ، إذا كانت العينة تحتوي على ما يكفي من الكائنات الحية الدقيقة و ما يكفي من الأوكسجين ، عينة يمكن قياسها مباشرة ، ولكن من أجل ضمان نمو الكائنات الحية الدقيقة ، تحتاج إلى إضافة كمية معينة من المواد الغذائية غير العضوية ( الفوسفات والكالسيوم والمغنيسيوم والحديد الملح ) . بعض المياه العادمة الصناعية التي لا تحتوي على أو تحتوي على أقل من الكائنات الحية الدقيقة ، وارتفاع درجة الحموضة المياه العادمة ، وارتفاع درجة الحرارة أو مياه الصرف الصحي المعالجة بالكلور التعقيم ، وما إلى ذلك ، يجب أن تكون متصلا مع الكائنات الحية الدقيقة التي يمكن أن تتحلل المواد العضوية في المياه قبل الاختبار ، وهذا الأسلوب يسمى التطعيم . عندما يكون هناك بعض المواد العضوية أو المواد السامة في مياه الصرف الصحي التي لا يمكن أن تتحلل من قبل الكائنات الحية الدقيقة في مياه الصرف الصحي المنزلي العادي بسرعة ، عينة من المياه يمكن أن تكون مخففة بشكل صحيح و تلقيح مع تلقيح المياه التي تحتوي على الكائنات الحية الدقيقة على التكيف بعد التأقلم . في العام ، bod5 اختبار نوعية المياه فقط تشمل استهلاك الأوكسجين المؤكسدة من الكربون العضوي و كمية صغيرة من المواد غير العضوية الحد من استهلاك الأوكسجين . الكثير من الكائنات الحية الدقيقة النترتة غالبا ما تكون موجودة في العديد من النفايات السائلة المعالجة الحيوية الثانوية و المياه الملوثة لفترة طويلة . هذه الكائنات الحية الدقيقة تصل إلى عدد معين من العمليات البيوكيميائية التي يمكن أن تنتج النترجة . من أجل الحد من استهلاك الأوكسجين النترجة ، بعض مثبطات النترتة ينبغي إضافتها .